بررسی تغییرات غلظت سرمی آنزیمه يا مربوط به فونکسیون کبد AST,LDH) (ALT, متعاقب از مصرف آرسنیک و اثرات محافظتی روي در رت

Transcript

1 مقاله پژوهشي بررسی تغییرات غلظت سرمی مربوط به فونکسیون کبد AST,LDH) (ALT, متعاقب از مصرف آرسنیک و اثرات محافظتی روي در رت 2 ١ زيبا رضواني سيچاني سيدعلياصغر مشتاقي تاریخ دریافت 1394/08/20 تاریخ پذیرش 1394/10/28 چکیده پيشزمينه و هدف: آرسنیک ازجمله عناصر سمی است. عنصر روي با خاصیت آنتا گونیس یت باشد.این مطالعه به بررسی نقش محافظتی ر يو بر سمیت آرسنیک بر روي پارامترهاي سرمی مربوط به عملکرد کبد میپردازد. مواد و روشها: تعداد 60 سر موش صحرایی نر از نژاد ویستار در 10 گروه آزمایشی تقسیمبندي شدند. گروهه يا شامل گروهه يا کنترل آرسنیک به مقدار 40mg/ l و 80 روي به میزان 40mg/ l و mg/l با آرسنیک میتواند نقش محافظتی در برابر سمیت این فلز داشته تقسیمشده به ترتیب در دورهي کوتاهمدت 40 آرسنیک و روي را بهصورت همزمان دریافت کردند و در دورهي بلندمدت گروها نصف دوز دورهي کوتاهمدت را بهصورت تجویز خوراکی دریافت کردند. و خونگیري بعد از اتمام یک دورهي 15 و 45 روزه انجام شد و سطح سرمی مربوط به عملکرد کبد اندازهگیري شد. يافتهها: بررسی نتایج نشان میدهد که دوزهاي مختلف آرسنات سدیم باعث کاهش فعالیت لاکتات دهیدروژناز آسپارتات آمینو ترانسفراز و آلانین آمینو ترانسفراز نسبت به گروه کنترل میشود. همچنین استفاده همزمان آرسنیک روي باعث افزایش فعالیت این آنزیمها میشود. (0/05 < P). نتيجهگيري: یافتهه يا مربوط به عملکرد کبد داشته باشد. کليدواژهها: آرسنیک عملکرد کبد ر يو حاصل از این تحقیق نشان میدهد که روي میتواند نقش محافظتی در برابر مسمومیت ایجادشده توسط آرسنیک بر سطح سرمی مجله پزشکی ارومیه دوره بیست و هفتم شماره اول ص فروردین 1395 ا درس مکاتبه: گروه بیوشیمی دانشگاه آزاد اسلامی واحد فلاورجان اصفهان ایران تلفن: مقدمه آلودگی محیطزیست از مساي ل عمدهاي است که امروزه قسمت اعظم تلاش برنامه ریزان اجتماعی را به خود اختصاص داده است (1). آرسنیک عنصري سمی و یکی از خطرناكترین آلودهکنندهه يا محیطی است (2). داراي 4 حالت اکسیداسیون متفاوت از قبیل (3- moshtaghie@pharm.mui.ac.ir ) میباشد و بسته به شرایط محیطی داراي ظرفیته يا مختلف است( 3 ). جزء فلزات سنگین (اصولا به دسته یا گروهی از عناصر اطلاق میشود که داراي وزن مخصوص بزرگتر از 7 گرم بر سانتیمتر مکعب و یا جرم اتمی بیشتر از 50 باشند) است (4). فلزات سنگین جزء آلایندهه يا موجودات زنده تمایل به تجمع زیس یت پایدار محسوب میشوند. این فلزات در بدن یا تغلیظ زیس یت دارند (5 6). مسیرهاي جذب آرسنیک در بدن بهطور عمده مسیرهاي تنفسی گوارشی و پوست میباشد( 7 ). قسمت اعظم دفع آرسنیک از طریق کلیهها صورت میگیرد و به میزان جزي ی نیز از طریق مدفوع و عروق دفع میشود( 8 ). آرسنیک بر اندامها و بافته يا مختلف بدن مانند بافت عصبی کلیوي قلبی-عروقی کبدي تولیدمثلی پوست و غیره اثرات زیانباري را بر جاي میگذارد (9 10). بر اساس آزمایشه يا انجام شده مشخص شده است که قرار گرفتن در معرض آرسنیک سبب بزرگ شدن کبد و افزایش غلظت آلانین آمینو ترانسفراز (ALT) و آسپارتات آمینو ترانسفراز (AST) میشود( 11 ). این عنصر باعث افزایش خطر ابتلا به انواع خاصی از سرطانه يا انسانی ازجمله سرطان پوست سرطان ریه مثانه و کبد است( 12, 13). همچنین آرسنیک سبب کاهش فعالیته يا گلوتاتیون پراکسیداز S ترانسفرازها گلوتاتیون ردوکتاز و کاتالاز در کبد گروه بيوشيمي دانشگاه ا زاد اسلامي واحد فلاورجان اصفهان ايران ١ ٢ گروه بيوشيمي دانشگاه ا زاد اسلامي واحد فلاورجان اصفهان ايران( نويسنده مسي ول) 51

2 بررسي تغييرات غلظت سرمي ا نزيمهاي مربوط به فونکسيون کبد... زيبا رضواني سيچاني و همکار میشود( 14, 15 ).آلانین آمینو ترانسفراز و آسپارتات آمینو ترانسفراز در واکنشه يا ترانس عمدتا در کبد سلوله يا مخطط شرکت میکند. که آسیبه يا قلبی و بافت عضله سلولی سبب آزاد شدن آلانین آمینو ترانسفراز و آسپارتات آمینو ترانسفراز به جریان خون میشود و سمیت کبدي را در پی دارد( 16, 17). همچنین در معرض قرار گرفتن حیوانات در آب حاوي آرسنیک سبب میشود که سلولهاي کبدي ازنظر بافتی دچار نکروز شود و فضاهاي سینوسی کبدي گسترش یابد( 16, 18). همچنین بیان شده است که آرسنیک سبب تحریک لاکتات دهیدروژناز کبدي (LDH) میشود( 19,.(20 باوجود اثرات سمی کبدي مطالعات کمی در اثر سمیت آرسنیک نسبت به کبد صورت گرفته است( 21 ). همچنین تجمع آرسنیک سبب بروز اختلال در وزن کل بدن وزن مطلق و نسبی کبد موش میشود که این ممکن است آرسنیک در سلوله يا تغییرات احیاء به دلیل کنندهي کبدي باشد( 22, 23). روي عنصر ضروري بعد از آهن شناخته شده است. روي یک عنصر کمیاب ضروري است که براي ساختار ر يو بیولوژیکی مختلف و عملکرد آنها لازم است. اهمیت در ارتباط با شرکت این عنصر در ساختمان متالوآنزیمها است. و تاکنون حدود 70 آنزیم شناختهشدهاند که در ساختمان آنها ر يو به کار رفته است( 24 ). محققین نشان دادند که در هر دو بیماري حاد و مزمن کبدي کاهش غلظت روي نقش دارد (25). روي داراي یک پتانسیل آنتیاکسیدانی براي غشاهاي زیس یت است و اثرات محافظتی این عنصر میتواند باعث کاهش تجمع کلاژن در کبد و اعمال نقش فیزیولوژیکی حیا یت عملکرد سلولی را در کبد تنظیم کند( 26 ). همچنین متعاقب مصرف آرسنیک و روي بهصورت همزمان سبب تعدیل اثرات سمی آرسنیک بر غلظته يا سرمی و نقش محافظتی ر يو از آرسنیک شده است( 27 ). هدف مطالعه حاضر بررسی نقش محافظتی ر يو بر سمیت کبدي ناشی در جلوگیري از سمیت آرسنیک بر پارامترهاي سرمی مربوط به عملکرد کبد (لاکتات دهیدروژناز آسپارتات آمینو ترانسفراز و آلانین آمینو ترانسفراز) در رته يا مواد و روشها نر نژاد ویستار میباشد. مواد لازم از کارخانهي اکراس Organics) ( Acros ساخت کشور آمریکا تهیه گردیدند. و همگی از نوع خالص آزمایشگاهی بودند. کیته يا بیوشیمیایی ) آزمایشگاهی در این پروژه از موشه يا Ratus Norvegicus جهت اندازهگیري پارامترهاي کبدي ( از شرکت پارس آزمون تهیه شدند. صحرایی نر بالغ ( Rats (با نام علمی از نژاد ویستار با میانگین وزنی 200±50 گرم استفاده شد. این حیوانات از مرکز آزمایشگاهی موسسه رازي کرج و خریداري پس از انتقال به لانه حیوانات دانشگاه فلاورجان بهمنظور جلوگیري از مبتلا شدن حیوانات به عفونت قبل از انتقال به قفسه يا مربوطه کلیهي قفسها پس از شستشو با محلول 5 درصد فنول ضدعفونی گردیدند. و آنها به مدت 7 روز تحت رژیم آنتیبیوتیک قرار داده شدند.آنتیبیوتیک مصرفی آموکسیسیلین بود که به میزان 1 میلیگرم بر لیتر به آب مصرفی حیوانات اضافه شد.موشها در اتاقی با درجه حرارت 37 درجه سانتیگراد و در شرایط 12 ساعت روشنایی و 12 ساعت تاریکی نگهداري شدند. رتها از غذاي فشردهشده ساخت کارخانه بهپرور و آب تصفیهشده لولهکشی شهر تغذیه گردیدند. براي آزمایشات In vivo در دورهي کوتاهمدت حیوانات به 5 گروه 6 تایی تقسیم شدند.یک گروه کنترل که روزانه تحت شرایط استاندارد از قبیل آب و غذا قرار گرفتند و دو گروه دیگر به ترتیب 40 و 80 میلیگرم آرسنات سدیم و یک گروه دیگر بهصورت همزمان 40 میلیگرم آرسنات سدیم و کلرید روي و یک گروه دیگر 40 میلیگرم کلرید روي را به مدت 15 روز بهصورت خوراکی دریافت کردند. در دورهي بلندمدت حیوانات به 5 گروه 6 تایی تقسیم شدند.یک گروه کنترل که روزانه تحت شرایط استاندارد از قبیل آب و غذا قرار گرفتند و دو گروه دیگر به ترتیب 20 و 40 میلیگرم بر لیتر آرسنات سدیم و یک گروه دیگر بهصورت همزمان 20 میلیگرم آرسنات سدیم و کلرید روي و یک گروه دیگر 20 میلیگرم کلرید روي را به مدت 45 روز بهصورت خوراکی دریافت کردند. در عمل خونگیري ابتدا رتها با استفاده از تزریق مخلوطی درصد و زایلازین 0/70 کتامین و شده بیهوش درصد 0/05 بلافاصله عمل خونگیري مستقیم از قلب با استفاده از سرنگ 10 سیسی انجام گرفت. بعد از مدتی نمونهها با سرعت 3000r.p.m به 10 مدت میکرولیتر سرم دقیقه سانتریفوژ گردید و گلبوله يا از بهآرامی بهوسیلهي تهنشین سمپلر شده 1000 جداسازي شد.میزان پارامترهاي مرتبط با کبد شامل آسپارتات آمینو ترانسفراز آلانین آمینوترانسفراز و لاکتات دهیدروژناز بهوسیلهي شیوهه يا آزمایشگاهی روشه يا و به گوناگون اندازهگیري براي گردید. اندازهگیري آنزیم آسپارتات آمینو ترانسفراز و آلانین آمینوترانسفراز از روش آزمایش )IFCC فدراسیون بینالمللی شیمی بالینی و طب آزمایشگاهی) استفاده گردید. و همچنین براي اندازهگیري لاکتات دهیدروژناز از روش آزمایش DGKC (استاندارد انجمن بیوشیمی آلمان) استفاده گردید.آزمایشات بیوشیمیایی توسط دستگاه اتوآنالیزر مدل هیتاچی 902 انجام شد. تجزیهوتحلیل توسط دادهها بررسی تفاوت معنیدار( 0/05>P) لحاظ آماري از آنالیز واریانس نرمافزار SPSS صورت گرفت میانگینها در بین گروهها به یکطرفه wayanova) (one 52

3 دوره ۲۷ شماره ۱ فروردين ۱۳۹۵ مجله پزشکي اروميه استفاده گردید. و براي بررسی تفاوته يا یک از هر معنیدار میانگینها نسبت به هم از آزمون تعقیبی significant difference least) (LSD, استفاده شد. براي تهیه هیستوگرامها از نرمافزار (Excel) استفاده گردید. یافتهها و پس از انجام آنالیزهاي مربوطه میزان تغییرات غلظت هر یک از پارامترها در دورهي کوتاهمدت و بلندمدت نسبت به گروه شاهد گروهه يا دریافتکنندهي آرسنات سدیم توأم با کلریدروي موردبررسی و تجزیهوتحلیل قرار گرفت.همانطور که از نمودار 1 برمیآید در دورهي کوتاهمدت دوزهاي 40 و 80 میلیگرم بر لیتر آرسنات سدیم سبب کاهش میزان آلانین آمینو ترانسفراز در سرم خون موشها نسبت به گروه کنترل شده است.که این کاهش ازلحاظ آماري معنیدار است. در مورد غلظت آسپارتات آمینو ترانسفراز که در نمودار 2 آمده است دوزهاي مختلف آرسنات سدیم سبب افزایش این میزان نسبت به گروه کنترلشدهاند.که این افزایش ازلحاظ معنیدار آماري دهیدروژناز با توجه به نمودار نبوده است. همچنین میزان غلظت لاکتات 3 در دوز 40 و 80 میلیگرم آرسنات سدیم نسبت به گروه کنترل به ترتیب افزایش و کاهش داشته است. که ازلحاظ آماري معنیدار نبوده است. کلرید روي در گروهه يا مختلف در مقایسه با گروه کنترل سبب کاهش 25 درصدي میزان آلانین آمینو ترانسفراز شده است. همچنین میزان آسپارتات آمینو ترانسفراز را 18 درصد افزایش داده است. در مورد پارامتر لاکتات دهیدروژناز باعث کاهش 22 درصدي آن شده است. (0/05 < P). همینطور تا ثیر اثرات محافظتی ر يو ر يو ر يو کبدي و تا ثیر توأم ر يو بر مسمومیت آرسنیک بر و آرسنیک بر پارامترهاي مذکور موردمطالعه قرار گرفت که نتایج نشان میدهد که تجویز خوراکی توأم با آرسنیک در دوز 40 میلیگرم بر لیتر در دورهي 15 روزه سبب کاهش 44 درصدي غلظت آلانین آمینو ترانسفراز نسبت به گروه کنترل شده است ) نمودار 1). همچنین تجویز خوراکی توأم با آرسنیک افزایش 9 درصدي میزان آسپارتات آمینو ترانسفراز نسبت به گروه کنترل داشته است ) نمودار 2). همچنین سبب کاهش 15 درصدي لاکتات دهیدروژناز نسبت به گروه کنترل شده است ) نمودار (3 0/05) <.(P همانطور که از نمودار 4 برمیآید در دورهي بلندمدت دوزهاي 20 و 40 میلیگرم بر لیتر آرسنات سدیم سبب کاهش میزان آلانین آمینو ترانسفراز در سرم خون موشها نسبت به گروه کنترل شده است. که این کاهش ازلحاظ آماري معنیدار است. نمودار (1) نمودار (2) ارقام شکل (۱): اثرات خوراکی آرسنات سدیم ) 40 و 80 میلیگرم بر لیتر ( و یا کلرید روي (40 میلیگرم بر لیتر ( به مدت 15 روز بر غلظت آلانین آمینو ترانسفراز و آسپارتات آمینو ترانسفراز مربوط به عملکرد کبد بهصورت Mean± SE براي 17 نمونه LSD) (One way ANOVA, نشان دادهشدهاند. a: تفاوت معنیداري نسبت به گروه کنترل (0/001> ). c: تفاوت معنیداري نسبت به گروه.( ). b: تفاوت معنیداري نسبت به گروه آرسنات 40. (0/05> ). d: تفاوت معنیدار با روي (0/05 < آرسنات.80 0/05) < 53

4 بررسي تغييرات غلظت سرمي ا نزيمهاي مربوط به فونکسيون کبد... زيبا رضواني سيچاني و همکار ارقام نمودار (3) <0/001) شکل (۲): اثرات خوراکی آرسنات سدیم ) 40 و 80 میلیگرم بر لیتر ( و یا کلرید روي (40 میلیگرم بر لیتر ( به مدت 15 روز بر غلظت آنزیم سرمی لاکتات دهیدروژناز مربوط به عملکرد کبد. بهصورت Mean± SE براي 17 نمونه LSD) (One way ANOVA, نشان دادهشدهاند. a: تفاوت معنیداري نسبت به گروه کنترل ). c :تفاوت معنیداري نسبت به گروه آرسنات 80. (0/05 <.( ). e: تفاوت معنیداري نسبت به گروه روي - آرسنیک. (0/001> نمودار (4) نمودار (5) ارقام <0/001) شکل (۳): اثرات خوراکی آرسنات سدیم ) 40 و 20 میلیگرم بر لیتر ( و یا کلرید روي (20 میلیگرم بر لیتر ( به مدت 45 روز بر غلظت سرمی آلانین آمینو ترانسفراز و آسپارتات آمینو ترانسفراز مربوط به عملکرد کبد. بهصورت Mean± SE براي 16 نمونه( LSD (One way ANOVA, نشان دادهشدهاند. a: تفاوت معنیداري نسبت به گروه کنترل. c: تفاوت معنیداري نسبت به گروه آرسنات 40. ).b: تفاوت معنیدار نسبت به گروه آرسنات (0/05 20 < < 0/05) ( ).d: تفاوت معنیدار با گروه روي. (0/05> < 0/05) ).e : تفاوت معنیداري نسبت به گروه روي آرسنیک (0/05 < ( 54

5 دوره ۲۷ شماره ۱ فروردين ۱۳۹۵ مجله پزشکي اروميه ارقام نمودار (6) شکل (۴): اثرات خوراکی آرسنات سدیم ) 40 و 20 میلیگرم بر لیتر ( و یا کلرید روي (20 میلیگرم بر لیتر ( به مدت 45 روز بر غلظت آنزیم سرمی لاکتات دهیدروژناز مربوط به عملکرد کبد. بهصورت Mean± SE براي 16 نمونه( LSD (One way ANOVA, نشان دادهشدهاند. a: تفاوت معنیداري نسبت به گروه کنترل < 0/05).( <0/001) در مورد غلظت آسپارتات آمینو ترانسفراز که در نمودار 5 آمده است دوزهاي 20 و 40 میلیگرم آرسنات سدیم به ترتیب سبب کاهش و افزایش این میزان نسبت به گروه کنترلشدهاند.که ازلحاظ آماري معنیدار بوده است. همچنین میزان غلظت لاکتات دهیدروژناز با توجه به نمودار 6 نسبت به گروه کنترل کاهش داشته است. که ازلحاظ آماري معنیدار نبوده است. کلرید روي در گروهه يا مختلف در مقایسه با گروه کنترل در دورهي بلندمدت سبب کاهش 17 درصدي میزان آلانین آمینو ترانسفراز شده است. همچنین میزان آسپارتات آمینو ترانسفراز را 8 درصد کاهش داده است. در مورد لاکتات دهیدروژناز باعث کاهش 35 درصدي آن شده است (0/05 >P). تجویز خوراکی روي توأم با آرسنیک در دوز 20 میلیگرم بر لیتر در دورهي 45 روزه سبب کاهش 19 درصدي غلظت آلانین آمینو ترانسفراز نسبت به گروه کنترل شده است (نمودار 4). همچنین تجویز خوراکی روي توأم با آرسنیک کاهش ). e: تفاوت معنیداري نسبت به گروه روي آرسنیک (0/05 <.( 17 درصدي میزان آسپارتات آمینو ترانسفراز نسبت به گروه کنترل داشته است (نمودار 5). همچنین سبب کاهش 35 درصدي لاکتات دهیدروژناز نسبت به گروه کنترل شده است ) نمودار 6) (0/05>P). بحث در حال حاضر بهخوبی مشخص شده است که آرسنیک سبب اختلالات وسیعی فعالیته يا در میشود( 9, بدن 23 ).دادهه يا حاصل از تحقیقات قبلی ما نشان داده است که این عنصر در فعالیته يا کبد موشه يا 20). 19, و آسیبه يا دادهه يا آزمایشگاهی تا ثیرگذار بوده است( 11, جدي به عملکرد کبد وارد میآورد( 14, 15). اراي هشده در این مقاله نشان میدهند که اختلالات کبدي در موشهایی که در معرض دوزهاي مختلف آرسنیک قرارگرفتهاند ممکن است رخ دهد. مطالعات اخیر نشان داده است که قرار گرفتن در معرض آرسنیک اغلب از طریق آب آشامید ین بیماريها از بسیا ير میشود( 28 ). آرسنیک آلوده سبب ایجاد بهعنوان یک عنصر سمی در محیطزیست یافت میشود. انسانها و حیوانات در معرض این فلز قرار میگیرند و مواجهه با آن باعث وارد شدن آسیب به کبد میشود همچنین گزارش شده است که با افزایش سطوح دوز آرسنیک آسیبه يا وارده به کبد بیشتر میشود( 29 ). نشان دادهشده است که مواجهه با آرسنیک باعث افزایش میزان فعالیت آنزیم آلانین آمینو ترانسفراز آسپارتات آمینو ترانسفراز و میشود( 11 ). در مطالعهي دیگري که بر روي صحرایی دهیدروژناز انجام گرفته است میزان فعالیت آلانین آمینو ترانسفراز و سرم کبدي موش لاکتات آسپارتات آمینو ترانسفراز 55

6 بررسي تغييرات غلظت سرمي ا نزيمهاي مربوط به فونکسيون کبد... زيبا رضواني سيچاني و همکار نسبت به گروه کنترل افزایش داشته است و بوده است( 30, 31 ).که این نتایج ازلحاظ آماري معنیدار مطابق نتایج موجود (دورهي کوتاهمدت در دوزهاي 40 و 80 میلیگرم آرسنیک که موجب افزایش غلظت آنزیم آسپارتات آمینو ترانسفراز و لاکتات دهیدروژناز شده است) در این پروژه بوده است. افزایش فعالیت این آنزیمها در دوزهاي مختلف آرسنیک ممکن است به این دلیل باشد که آرسنیک باعث افزایش فعالیت سنتز آنها شده که نشاندهندهي نشت سلو یل و از دست دادن غشاء کبدي است( 32, 33). با توجه به تحقیقات گزارش شده میزان پلاسمایی آلانین آمینو ترانسفراز و آسپارتات آمینو ترانسفراز در گونهاي از ماهی که در معرض آرسنیک در 20 روز قرار گرفت بهطور قابلتوجهی افزایش یافته است. این گزارش میدهد نشان که با افزایش دوز آرسنیک میزان آلانین آمینو ترانسفراز و آسپارتات آمینو ترانسفراز افزایش مییابد و سلولهاي کبدي منجر به آسیبهایی مانند تغییر شکل بزرگ شدن نکروز و انحطاط سلوله يا کبدي شده است( 34 ). فلزات سنگین سبب آسیب بافت کبدي میشود و همچنین آسپارتات آمینو ترانسفراز میتواند بهعنوان نشانگر زیس یت در پلاسماي از آسیب سلولی خون تخریب پروتي ین و آسیب کبدي استفاده شود( 35 ). همچنین مطابق با نتایج ما فعالیت سرمی آلانین آمینو ترانسفراز و آسپارتات آمینو ترانسفراز در کبد ماهی پس از قرار گرفتن در معرض آرسنیک با دوز 28/30 میلیگرم بر لیتر افزایش یافته است. این نتایج نشان داد که آرسنیک سبب افزایش سطح آلانین آمینو ترانسفراز و آسپارتات آمینو ترانسفراز میشود و هر چه بیشتر در معرض آرسنیک قرار بگیرد سمیت آن بیشتر میشود درنتیجه خسارات وارده به کبد بیشتر میشود و نتایج آن بستگی به دوز و مدتزمان آن دارد( 36 ). همچنین محققان گزارش دادند که افزایش آلانین آمینو ترانسفراز و آسپارتات آمینو ترانسفراز سرم بهعنوان یک نتیجه از تغییرات متابولیکی در کبد میباشد که پس از تجویز سم سیروز کبدي هپاتیت سرطان کبد گزارش شده است( 37 ). همچنین مطابق با نتایج ما هومتسو و همکاران نشان دادند که مواجهه با آرسنیک باعث کاهش فعالیت آلانین آمینو ترانسفراز و آسپارتات آمینو ترانسفراز و لاکتات دهیدروژناز در کبد ماهی شده است که این کاهش در غلظته يا پایینتر آرسنیک معنیدار نبوده است (15). همچنین در مطالعات مشابه گزارش دادند که اثر آرسنیک سبب کاهش معنیدار آنزیم آلانین آمینو ترانسفراز نسبت به گروه کنترل فعالیته يا میشود( 38 ). به گفتهي محققین تنوع آنزیمی اعم از کاهش و افزایش در فلزات سنگین به دلیل افزایش نفوذپذیري سلول و همچنین اثر مستقیم آرسنیک بر بافت است. بنابراین افزایش یا کاهش قابلتوجهی از آنزیمها را میتوان به افزایش سطح آرسنیک به بافت نسبت داد( 15 ). درنتیجه آرسنیک میتواند سبب مهار را کاهش دهد. همچنین کاهش فعالیته يا کبدي شود و فعالیت آنها آلانین آمینو ترانسفراز و آسپارتات آمینو ترانسفراز و لاکتات دهیدروژناز سبب اختلال در ساختار و یکپارچگی اندامکه يا سلولی مانند شبکه آندوپلاسمی و سیستم حملونقل غشایی و فرآیندهاي غشایی ایجادشده و سبب کاهش فعالیته يا گلوتاتیون پراکسیداز گلوتاتیون ردوکتاز و کاتالاز در کبد بهعنوان نتیجه در معرض قرار گرفتن آرسنیک است( 14, 15 ).روي همچنین نقش مهمی در سمزدایی فلزات و ایجاد ثبات در غشاء و فرآیندهاي غشایی بازي میکند( 39, 40). در این مطالعه تجویز خوراکی ر -وي آنزیم کاهش یافته شده است که آرسنیک و روي منجر به افزایش میزان فعالیت احتمالا حاکی از آن است که روي اثر محافظتی خود را بر روي آرسنیک گذاشته است و مانع از تخریب بافت کبد توسط آرسنیک شده است.مطابق با نتایج ما کومار و همکاران نشان دادند که تجویز خوراکی همزمان آرسنیک با دوز 227 میلیگرم بر لیتر و روي با دوز 227 میلیگرم بر لیتر به مدت 3 ماه به رتها سبب تعدیل اثرات سمی آرسنیک بر غلظته يا سرمی و نقش محافظتی ر يو بر سمیت کبدي ناشی از آرسنیک شده است( 27 ). و همچنین مطابق با نتایج این پروژه روي بهعنوان یک آنتیاکسیدان توانایی مقابله با این مکانیسم را داشته و سبب بهبود فعالیت نتیجهگیري آرسنیک یک کبدي میگردد( 26 ). آلایندهي زیستمحیطی است که سمیت آن بهطور وسیعی موردمطالعه و بررسی قرار گرفته است. همچنین بر مطالعهي اساس کنونی درمجموع میتوان گفت که آرسنیک بالا خص در دوزهاي بالا داراي اثر سمی بوده و باعث تغییر در سطح سرمی با تجویز خوراکی ر يو تشکر و قدردانی مربوط به عملکرد کبد میگردد. اما این اثر سمی کاهش مییابد. لازم است از آزمایشگاه تحقیقاتی دانشگاه آزاد اسلامی واحد فلاورجان و همچنین از افرادي که در این مطالعه مساعدت و همکاري به عمل آوردند قدردانی نماییم. 56

7 دوره ۲۷ شماره ۱ فروردين ۱۳۹۵ مجله پزشکي اروميه References: 1. Silva A, Novelli E, Fascineli M, Almeida J. Impact of an environmentally realistic intake of water contaminants and superoxide formation on tissues of rats. Environ Pollution 1999;105(2): Jolliffe D. A history of the use of arsenicals in man. J Royal Soc Med 1993;86(5): Tu C, Ma LQ, Bondada B. Arsenic accumulation in the hyperaccumulator Chinese brake and its utilization potential for phytoremediation. J Environ Quality 2002;31(5): Mance G, Worsfold P. Pollution threat of heavy metals in aquatic environments. London: Elsevier; Schulman AE. Arsenic occurrence in public drinking water supplies: Citeseer; Organization WH. Guidelines for drinking-water quality: recommendations. World Health Organization; Nico PS, Ruby MV, Lowney YW, Holm SE. Chemical speciation and bioaccessibility of arsenic and chromium in chromated copper arsenatetreated wood and soils. Environ Sci Tech 2006;40(1): Peraza M, Carter D, Gandolfi A. Toxicity and metabolism of subcytotoxic inorganic arsenic in human renal proximal tubule epithelial cells (HK- 2). Cell biology and toxicology 2003;19(4): Wu MM, Chiou HY, Wang TW, Hsueh YM, Wang IH, Chen CJ, et al. Association of blood arsenic levels with increased reactive oxidants and decreased antioxidant capacity in a human population of northeastern Taiwan. Environ Health Perspectives 2001;109(10): Hughes MF. Arsenic toxicity and potential mechanisms of action. Toxicol letters 2002;133(1): RAO KJ, Devaraju K, SuJjatha S. Impact of sodium arsenate on selected enzymes and histopathollogiicaal studies in albino mice. J Pharmacy Biol Sci 2010;1(3): Tseng WP. Effects and dose-response relationships of skin cancer and blackfoot disease with arsenic. Environ Health Perspectives 1977;19: Chen CJ, Chuang YC, Lin TM, Wu HY. Malignant neoplasms among residents of a blackfoot diseaseendemic area in Taiwan: high-arsenic artesian well water and cancers. Cancer Res 1985;45(11): Mazumder DG. Effect of chronic intake of arseniccontaminated water on liver. Toxicol Appl Pharmacol 2005;206(2): Humtsoe N, Davoodi R, Kulkarni B, Chavan B. Effect of arsenic on the enzymes of the rohu carp Labeo rohita (Hamilton, 1822). Raffles Bull Zool 2007;14: Islam K, Haque A, Karim R, Fajol A, Hossain E, Salam KA, et al. Dose-response relationship between arsenic exposure and the serum enzymes for liver function tests in the individuals exposed to arsenic: a cross sectional study in Bangladesh. Environ Health 2011;10(64): Paliwal A, Gurjar R, Sharma H. Analysis of liver enzymes in albino rat under stress of λ-cyhalothrin and nuvan toxicity. Biol Med 2009;1(2): Ferzand R, Gadahi JA, Saleha S, Ali Q. Histological and haematological disturbance caused by arsenic toxicity in mice model. Pakistan Jbiological sciences: PJBS 2008;11(11): Sharma A, Sharma MK, Kumar M. Protective Effect of Mentha piperita against Arsenic Induced Toxicity in Liver of Swiss Albino Mice. Basic Clin Pharmacol Toxicol 2007;100(4): Eze E, Dawud F, Zainab A, Jimoh A, Malgwi I, Isa A. Preliminary studies of effects of vitamin C and zinc on some liver enzymes in alloxan-induced diabetic wistar rats. Asian J Med Sci 2012;4(1):

8 بررسي تغييرات غلظت سرمي ا نزيمهاي مربوط به فونکسيون کبد... زيبا رضواني سيچاني و همکار 21. Niimi AJ. Review of biochemical methods and other indicators to assess fish health in aquatic ecosystems containing toxic chemicals. J Great Lakes Res 1990;16(4): Yousef MI, El-Demerdash FM, Radwan FM. Sodium arsenite induced biochemical perturbations in rats: ameliorating effect of curcumin. Food Chem Toxicol 2008;46(11): El-Demerdash FM, Yousef MI, Radwan FM. Ameliorating effect of curcumin on sodium arsenite-induced oxidative damage and lipid peroxidation in different rat organs. Food Chem Toxicol 2009;47(1): Matović V, Buha A, Bulat Z, Đukić-Ćosić D. Cadmium toxicity revisited: focus on oxidative stress induction and interactions with zinc and magnesium. Arhiv za higijenu rada i toksikologiju 2011;62(1): Stamoulis I, Kouraklis G, Theocharis S. Zinc and the liver: an active interaction. Digestive Diseases Sci 2007;52(7): Sidhu P, Garg M, Dhawan D. Protective effects of zinc on oxidative stress enzymes in liver of protein deficient rats. Nutr Hosp 2004;19(6): Kumar A, Malhotra A, Nair P, Garg M, Dhawan DK. Protective role of zinc in ameliorating arsenicinduced oxidative stress and histological changes in rat liver. J Environ Pathol Toxicol Oncol 2010;29(2): Barchowsky A, Cartwright IL, Reichard JF, Futscher BW, Lantz RC. Arsenic toxicology: translating between experimental models and human pathology. Environ Health Perspect 2011;119(10): Woods JS, Fowler BA. Effects of chronic arsenic exposure on hematopoietic function in adult mammalian liver. Environ Health Perspect. 1977;19: Mallick P, Mallick JC, Guha B, Khuda-Bukhsh A. Ameliorating effect of microdoses of a potentized homeopathic drug, Arsenicum Album, on arsenicinduced toxicity in mice. BMC Complement Alternative Med 2003;3(1): Muthumani M, Prabu SM. Silibinin potentially protects arsenic-induced oxidative hepatic dysfunction in rats. Toxicol Mechanisms Methods 2012;22(4): Gaskill C, Miller LM, Mattoon J, Hoffmann W, Burton SA, Gelens HC, et al. Liver histopathology and liver and serum alanine aminotransferase and alkaline phosphatase activities in epileptic dogs receiving phenobarbital. Veterinary Pathol Online 2005;42(2): Banerjee P, Bhattacharyya SS, Bhattacharjee N, Pathak S, Boujedaini N, Belon P, et al. Ascorbic acid combats arsenic-induced oxidative stress in mice liver. Ecotoxicol Environ safety 2009;72(2): Abdel-Hameid N-AH. A protective effect of calcium carbonate against arsenic toxicity of the Nile catfish, Clarias gariepinus. Turkish J Fisheries Aquatic Sci 2009;9(2) Markovich D, James KM. Heavy metals mercury, cadmium, and chromium inhibit the activity of the mammalian liver and kidney sulfate transporter sat- 1. Toxicol Appl Pharmacol 1999;154(2): Vutukuru SS, Prabhath NA, Raghavender M, Yerramilli A. Effect of arsenic and chromium on the serum amino-transferases activity in Indian major carp, Labeo rohita. Int J Environ Res Public Health 2007;4(3): Chalasani N, Aljadhey H, Kesterson J, Murray MD, Hall SD. Patients with elevated liver enzymes are not at higher risk for statin hepatotoxicity. Gastroenterol 2004;126(5): Karmakar R, Mondal T, Saha B, Ban DK, Dey B, Dastidar PG, et al. Arsenic induced Biochemical perturbation in Swiss Albino Mice and Cytoprotective activities of Curcumin. Int J Environ Sci 2011;2(1):

9 دوره ۲۷ شماره ۱ فروردين ۱۳۹۵ مجله پزشکي اروميه 39. Vallee BL, Falchuk KH. The biochemical basis of zinc physiology. Physiological Rev 1993;73(1): Bettger WJ, O'Dell BL. Physiological roles of zinc in the plasma membrane of mammalian cells. J Nutr Biochemis 1993;4(4):

10 The Journal of Urmia University of Medical Sciences, Vol. 27(1), April 2016 Original Article INVESTIGATING THE CHANGES in SERUM CONCENTRATIONS ENZYMES RELATED TO LIVER FUNCTION (ALT, AST, LDH) OF CONTINUED ARSENIC use AND THE PROTECTIVE EFFECT OF ZINC ON LIVER ENZYMES IN RATS Ziba Rezvanie Sechanie 1, Seyed Ali Asghar Moshtaghie 2 * Received: 11 Nov, 2015; Accepted: 19 Mar, 2016 Abstract Background & Aims: Arsenic (As) is one of the toxic metals. Zinc (Zn) supplementation could have a protective effect against arsenic toxicity because of their antagonistic properties. In this study, the influence of Zn on toxicity that is caused by As on serum parameters related to liver function has been investigated. Materials & Methods: In this experimental study, a total of 60 male Wistar rats were randomly allocated into ten groups. In a short-term period: group 1 was the control, group 2, and 3 received 40 and 80 mg/l As sodium, group 4 received 40 mg/l Zn, and group 5 received 40 mg/l As sodium and zinc simultaneously. In a long-term period groups received half the dose of short-term period with oral administration. Blood samples were taken over a 15-day and 45-day period and serum enzymes of the liver were measured. Results: The result showed that administration of four different doses of As sodium decreased the activity of lactate dehydrogenase, aspartate aminotransferase, and Aalanine aminotransferase compared to the control group. Moreover, the simultaneous use of As sodium with zinc increased the activity of lactate dehydrogenase, aspartate aminotransferase and Aalanine aminotransferase. (P<0.05) Conclusion: Zinc supplementation can have protective effects against the toxicity caused by As on serum enzymes liver. Keywords: Arsenic, Liver function, Zinc Address: Department of Biochemistry, Faculty of Basic Science, Falavarjan Branch, Isfahan, Iran Tel: moshtaghie@pharm.mui.ac.ir SOURCE: URMIA MED J 2016: 27(1): 60 ISSN: Department of Biochemistry, Falavarjan Branch, Islamic Azad University, Isfahan, Iran 2 Department of Biochemistry, Falavarjan Branch, Islamic Azad University, Isfahan, Iran (Corresponding Author) 60